NGS Normalizer Kit(NGB-61900):去除引物二聚体;一起整理和标准PCR产品;运用离心法快速(不到20分钟)、高通量且易于处理;满足的洗脱体积(100µL)用于重复或未来的测定;非磁珠净化。
艾美捷NGS Normalizer Kit答应高通量NGS文库PCR扩增子NGS文库PCR产品浓度的净化和标准化(~5±1 ng/µL)。整理去除了一切PCR副产品,包括引物、二聚体、酶和未兼并的核苷酸。纯化根据96孔柱色谱法,运用Norgen的专有树脂作为别离基质。金额每个96孔中的Norgen矩阵被优化为具有有限的结合才能,因而每个孔能够洗脱持平浓度的PCR产品。
该进程包括首要增加3卷将缓冲液SK加入到PCR产品中,然后将混合物装载到96孔标准化上盘子然后用所供给的洗刷溶液A洗刷结合的PCR扩增子,以便除掉任何残留的杂质,并用洗脱缓冲液B洗脱纯化的PCR扩增子。纯化和标准化的文库PCR扩增子能够适用于NGS作业流程和其他测序运用。
•应运用变速离心机以取得最大的套件功能。假如变量高速离心机是不可用的,能够正常的运用固定速度的离心机,但削减能够观察到产率。
•经过增加90 mL 96-100%乙醇制备作业浓度的洗刷溶液a(由用户更好的供给)至供给的含有浓缩洗刷溶液的瓶子
A.这将供给128毫升的终究体积。瓶子上的标签有一个盒子,能检查以标明已增加乙醇。
1.将3体积的缓冲液SK直接增加到包括文库PCR延伸的每个孔中产品(例如:将60µL缓冲液SK增加到20µL文库PCR产品中)。混合方法上下吸移或用胶带涡旋密封板并时间短离心盘子。
注:保证每个孔中的一切裂解物都已进入底部盘子假如整个裂解液体积未经过,则再离心2分钟。
6.将400µL洗刷溶液A涂改在96孔正火板的每个孔上。以最大速度或3200 x g(约4000 RPM)离心组件2分钟。
注:保证每个孔中的一切裂解物都已进入底部盘子假如整个裂解液体积未经过,则再离心2分钟。
9.以最大速度或3200 x g(约4000 RPM)离心组件15分钟以使板彻底枯燥。
运用供给的胶带密封洗脱板。纯化的DNA样品能够在–20°C下贮存几天。主张将样品放置在–70°C的温度下用于长时间贮存回来搜狐,检查更加多
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